每个系统包含足够100 次标准检测的试剂。包括:
1 瓶 萤光素酶检测底物溶液
1 瓶 ATP母液
1 瓶 萤光素酶检测缓冲液
1 瓶 细胞培养裂解液,5X
使用说明:
1 裂解细胞:吸掉细胞培养皿中的培养基,用PBS洗涤一次。将5X的细胞培养裂解液用水稀释到1X,充分混匀后,足量加入到细胞培养皿中(如400μL/60mm培养皿,900μL /100mm,30μL /96孔板)充分裂解细胞。
2 充分裂解后,10,000-15,000g离心3-5分钟,取上清用于测定。如果在96孔板中裂解细胞可不离心直接转移到96孔板中进行测定。
注:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
3 融解萤光素酶检测底物溶液,并达到室温。
备注:第一次溶解后必须用避光管将其分装,反复冻融会降低检测效率。
4 按仪器操作说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,将测定间隔设为2秒,测定时间设为5秒。
5 每个样品测定时,取样品20-100微升(如果样品量足够,请加入100微升;如果样品量不足可以适当减少用量,但同批样品的使用量宜保持一致)。
6 加入100微升(与样品加入量相同,如加入30μL样品,则检测试剂同样加入30μL)萤光素酶检测试剂,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定。以报告基因细胞裂解液为空白对照。
保存条件
细胞裂解液-20ºC保存一年有效, 4 ºC三个月有效;萤光素酶检测试剂-20ºC避光保存6个月有效,-80ºC避光保存一年有效。
高雪