成果简介:
•通过基因工程技术,在多形拟杆菌中鉴定并克隆了与肝素黄杆菌肝素酶具有较高同源性的新的肝素酶 I 基因,构建了其重组大肠杆菌生产菌株,确定了酶学性质。
•在此基础上,对酶分子进行了理性分子改造,使重组酶的可溶性表达量和热稳定性均显著提升,优化确定了工程菌表达的最佳条件。
成果核心创新点:
本成果多形拟杆菌肝素酶 vs 工业用肝素黄杆菌肝素酶 I
•拟杆菌是人体正常菌群,被认为是下一代益生菌的重要来源,欧洲委员会已开始批准在食品加工中使用拟杆菌属菌株
•比酶活提高一倍
•可溶性表达量显著提升
•热稳定性显著提升(40℃半衰期较野生型提高了104.35%,50℃半衰期提高了143.5%)
•工程菌酶活产量可达3.937x105 IU/L (5L发酵罐)
成果详细用途:
低分子肝素由于抗凝效果好,对血小板功能影响少、副作用小、皮下注射吸收好、体内半衰期较长等诸多优点,被广泛应用于临床。据GIR
(Global
Info Research)调研,2021年全球肝素市场规模超过45亿美元,低分子肝素收入约348.4百万美元,预计2022-2028年复合年增长率超3%。
目前,酶解法中的肝素酶主要源自肝素黄杆菌中肝素酶I的分离纯化,但此法所得到的肝素酶产量低、纯化困难,造成酶的成本非常昂贵,也极大地限制了酶法制备低分子肝素的发展。本成果的产量、活性及稳定性均高于目前工业用同类产品。
预期效益说明:
技术转让,技术许可,技术开发
金额面议