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氟化酶（FIA）是唯一可以将无机氟安装到有机分子中以形成碳氟键的酶。FIA 能够在温和条件下在水溶液中形成 C-F键，因此，这种“绿色”反应对于 PET放射性示踪剂的制备非常理想。但是，总的来说，就生物转化能力而言，氟化酶是相对“慢的酶”。而且，作为催化剂的稳定性低。因此，当前研究的目的是检查我们是否可以通过标记合适的 SAP 伙伴来增强荧光酶的酶活性，热稳定性和可重复使用性。自组装短肽标签是具有亲水性残基和疏水性残基序列的一种双亲性短肽，在与目的蛋白结合后，能够促使目的蛋白自组装具有纳米尺寸的蛋白质聚集体。由此出发我们制备三种 SAP自组装双亲短肽融合氟酶，分别为18A，L6KD和 ELK16。
氟化酶（FIA）是唯一可以将无机氟安装到有机分子中以形成碳氟键的酶。FIA 能够在温和条件下在水溶液中形成 C-F键，因此，这种“绿色”反应对于 PET放射性示踪剂的制备非常理想。但是，总的来说，就生物转化能力而言，氟化酶是相对“慢的酶”。而且，作为催化剂的稳定性低。因此，当前研究的目的是检查我们是否可以通过标记合适的 SAP 伙伴来增强荧光酶的酶活性，热稳定性和可重复使用性。自组装短肽标签是具有亲水性残基和疏水性残基序列的一种双亲性短肽，在与目的蛋白结合后，能够促使目的蛋白自组装具有纳米尺寸的蛋白质聚集体。由此出发我们制备三种 SAP自组装双亲短肽融合氟酶，分别为18A，L6KD和 ELK16。
技术突破为：
(1) 发现经过 SAP 融合的氟酶以包涵体形式存在，但仍保有催化活性。
(2) 在纯化上，SAP 氟酶可以一步纯化，摆脱了传统的亲和层析色谱纯化浓缩的方式，缩短制备时间和成本。
(3) 发现可溶性氟酶的最适温度在40 度，ELK 的最适温度同样为37度；而 L6KD 的酶活最适温度在 50 度，18A 的酶活最适温度在 60度。并且 18A 的催化常数 (Kcat) 较可溶性氟酶提高一倍以上。
(4) SAP 氟酶如 FIA-L6KD 在其最适温度的酶活半衰期，远远高于可溶性氟酶的在其最适温度的酶活半衰期。
(5) SAP 氟酶能够循环利用，经过 9 次重复利用后，FIA-ELK16、FIA-L6KD 和 FIA-18A 的活性分别保留了76.3%、63.8% 和 46.4%。
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张女士
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